Беременность крольчихи срок: Сколько длится беременность у кроликов. Период, продолжительность беременности у кроликов

(например, Нидерланд Гварф, польский карлик Hotot, Britannia Petite, Голландия LOP)

(напр. г. Флорида белая, мини-лоп, голландская, гавана)

(например, новозеландская, шампань д'аржан, калифорнийская, паломино)

от 6 до 7 месяцев

В зависимости от породы коммерческие породы достигают половой зрелости при массе тела 9-10 фунтов )

Гигантские породы не достигают полного физического развития до этого возраста масса.Она может зачать ребенка в любое время года на протяжении всей жизни. Тем не менее, по данным Reproduction Toxicology , производство яйцеклеток и сперматозоидов снижается после 3-летнего возраста.

Во время спаривания крольчонок садится на крольчиху сзади, проникает в самку и выполняет быстрые толчки тазом бедра. Эта встреча продлится всего 20-40 секунд, после чего самец бросится назад с самки.

Беременность у кроликов короткая и составляет от 28 до 36 дней (в среднем 31 день). Более длительные периоды беременности приводят к меньшим пометам, тогда как более короткие периоды беременности приводят к большим пометам.

Размер помета может варьироваться от 4 до 12 крольчат. Самки кроликов могут рожать до 60 крольчат в год, если условия жизни идеальны. После рождения крольчиха может забеременеть уже на следующий день.

К сожалению, смертность эмбрионов кроликов высока. Это часто происходит из-за травмы, инфекции, экологического стресса и плохого питания.Поэтому для противодействия этому необходимо обеспечить высокий коэффициент рождаемости.

Признаки того, что ваша крольчиха беременна

Когда крольчиха достигает половой зрелости, она может начать производить потомство. Если интактная самка и интактный самец были оставлены вместе, и оба были старше 3,5 месяцев, вам придется следить за самкой на предмет любых признаков беременности.

Узелки на животе

Как и у большинства млекопитающих, живот беременной самки будет увеличиваться по мере того, как ее детеныши растут и развиваются в ее матке. Поэтому растущий живот – это видимый признак того, что крольчиха беременна.

Через 10–12 дней после осеменения вы можете почувствовать множественные бугорки размером с мрамор в животе вашей самки. Эти крошечные шишки — это маленькие крольчата в животе вашего кролика, и они будут достаточно большими, чтобы вы могли их почувствовать.

Шишки будут продолжать расти внутри вашей крольчихи еще около 2 недель, пока крольчихе не придет время рожать (примерно через 1 месяц после осеменения).

Изменения в поведении

Беременные крольчихи едят больше и часто становятся более раздражительными и капризными.Однако, если ваша крольчиха обычно замкнута или недружелюбна, может быть трудно определить, что она беременна, основываясь только на ее настроении.

Гнездовье

Самым заметным признаком будет то, что ваш кролик начнет обустраивать гнездо. Она может начать собирать подстилку или копаться в углу клетки.

Крольчиха обычно собирает сено или другие предметы, которые можно нести во рту, чтобы создать удобное место для родов. Она также может сдвинуть вместе свободные постельные принадлежности или сдвинуть одеяла.

Что больше всего тревожит владельцев, которые раньше не занимались разведением кроликов, так это гнездящийся кролик, выдергивающий собственный мех, чтобы выстилать гнездо. Это совершенно нормально.

Если ваш кролик гнездится, ожидайте, что он родит в течение одной недели. Если она начнет выдергивать свой мех, она, вероятно, родит в течение следующих 1-2 дней.

Большинство крольчат рожают ночью, поэтому ожидайте, что проснетесь с выводком котят.

Если ваша беременная крольчиха не родила через 35 дней осеменения, как можно скорее обратитесь к ветеринару.Ваш ветеринар либо вызовет роды, либо удалит детей хирургическим путем.

Беременная крольчиха может начать гнездиться примерно за неделю до того, как она будет готова к родам.

Роды кроликов

Период беременности кроликов обычно составляет от 28 до 36 дней, в среднем 31 день.

Когда крольчиха рожает, это называется крольчата. Разжигание происходит ночью или рано утром и занимает около 15 минут.

Процесс родов протекает инстинктивно, поэтому им редко требуется помощь человека во время родов.

После того, как вы проверили всех крольчат, оставьте кроличье гнездо в покое на первые несколько дней. Нарушение гнезда крольчихи может вызвать у нее стресс , что может помешать ей кормить свое потомство.

Кроличьи пометы

Молодняк кроликов называют детенышем, и в каждом помете может быть 1-14 крольчат, в среднем 6. Котята рождаются слепыми, безволосыми и глухими. Через 10 дней они начнут правильно развиваться.

В соответствии с Биологией размножения , крольчиха будет кормить своих детенышей каждую ночь .

Кормление грудью занимает около 5 минут только из-за высокой энергетической ценности материнского молока, как показано в исследовании, опубликованном в журнале Animal Reproduction Science .

Наборы кроликов полностью отлучены от груди в возрасте 4-6 недель. Продолжайте держать самку кролика отдельно от самца. Самка кролика может снова забеременеть через несколько часов после родов.

Ложная беременность крольчихи

Хотя и редко, но у некоторых крольчих случается ложная беременность .Крольчиха с ложной беременностью может демонстрировать типичное для беременности поведение, например гнездование.

Если вы подозреваете, что у вашей крольчихи ложная беременность, отведите ее к ветеринару. Если вы не хотите, чтобы ваши крольчихи забеременели, настоятельно рекомендуется их стерилизовать или стерилизовать.

Почему вам не следует разводить кроликов

Легко забыть, что кролики являются добычей, когда мы получаем их в качестве компаньонов. Как и другие животные-жертвы, кролики продолжают производить потомство, чтобы сохранить свой вид и противостоять сильному хищничеству в дикой природе.

Однако в случае домашних животных разведение может создать проблему слишком большого количества кроликов.

Кролики отличаются от других млекопитающих тем, что самки кроликов овулируют после того, как самец оседлал их — этот процесс называется индуцированной овуляцией. Это единственный раз, когда крольчиха откладывает яйцо.

Это означает, что после того, как крольчиха родит, есть большая вероятность, что она снова забеременеет, если самец все еще присутствует. Крольчиха может забеременеть уже через несколько часов после родов.

Проблемы разведения кроликов

Проблемы, связанные с беременностью, гораздо более серьезны, когда крольчиха рожает в молодом возрасте. Независимо от возраста, ниже приведены некоторые распространенные проблемы, которые могут возникнуть, если крольчиха забеременеет.

• Ваш кролик может быть сбит с толку и не может построить гнездо для своих детенышей, в результате чего новорожденные котята погибнут от воздействия.
• У вашей крольчихи может не образоваться молоко или она не сможет их кормить.
• Существует повышенный риск гибели крольчат, особенно если их кормят с рук люди.
• Если отец был более крупной породы, чем мать, у матери могут возникнуть трудности при родах и она может умереть во время родов.
• Если мать нездорова, она может заболеть из-за стресса, связанного с вынашиванием и рождением детей.

Если вы позволите своим кроликам размножаться, разработайте план для выживших 4-12 крольчат. Вы можете либо найти для них заботливых и ответственных хозяев, либо позаботиться о них самостоятельно.

Если вы решите оставить их себе, поймите, что они будут вашей ответственностью в течение следующих 8-10 лет.Вам также придется стерилизовать и стерилизовать каждого из них.

Любой кролик, рожденный по ошибке или по плану, отбирает дом у кролика в приюте. Каждый год несколько кроликов умирают из-за того, что не находят дома.

Поэтому, если вы хотите пополнить свою семью кроликами, подумайте о том, чтобы посетить местный приют. Посмотрите, не нуждаются ли другие кролики в доме.

Почему вы должны стерилизовать или стерилизовать кроликов

В идеале вы должны стерилизовать или стерилизовать своих кроликов. Стерилизованные самки кроликов живут дольше, потому что вы устраняете риск возникновения опухолей молочных желез, яичников или матки.

Самцы кроликов гораздо менее агрессивны, меньше дерутся со своими товарищами по клетке, менее территориальны и более надежны после кастрации.

Что еще более важно, кролики, которые были стерилизованы или кастрированы, не могут производить нежелательных пометов. Это помогает контролировать количество бездомных кроликов в приютах.

Принципы разведения кроликов

Если вы хотите разводить кроликов, помните о следующих принципах:

• Разводите кроликов одной породы.Нельзя продавать породистых кроликов со смешанной кровью в родословной, восходящей к 4 поколениям.
• Не держите кроликов в одной клетке, если им 3 месяца или больше. Кролики быстрее взрослеют, не размножаются и не дерутся в одиночестве, тем самым исключая нежелательные результаты.
• Проверьте дно клетки на наличие признаков жидкого стула или диареи. Никогда не разводите кроликов с этим заболеванием, пока оно не будет полностью вылечено.
• Проверьте признаки болезни/инфекции в половых органах обоих кроликов.Обращайте внимание на красные флажки, такие как сильное покраснение, болезненность, выделения или струпья.
• Отведите самку к клетке оленя. Если сделать наоборот, у самцов снизится склонность к размножению, так как они слишком заняты, обнюхивая вольер самки.
• Если вы решите удалить самку после спаривания кроликов, поместите самку обратно к самцу через 1–12 часов после осеменения. Это повышает вероятность беременности и увеличивает количество потомства.
• Запишите день осеменения в календаре и проверьте ее на стельность с 10-го по 14-й день первого осеменения.
• Чтобы проверить беременность крольчихи, прощупайте ее нижнюю часть живота большим и указательным пальцами. Вы должны почувствовать шишки размером с мрамор.
• Поместите гнездо рядом с клеткой крольчихи на 29-й день после осеменения.
• Никогда не разводите близкородственные пары, такие как брат и сестра, мать и сын, отец и дочь.

Не проверяйте беременность крольчихи, повторно спаривая ее. Этот метод не только более неточен, но и опасен для жизни вашего кролика и его потомства.

Самки кроликов имеют два рога матки. Оба рога могут нести младенцев. Когда вы размножаете свою крольчиху, ее первый рог оплодотворяется. Разведение ее дважды приводит к оплодотворению ее второго рога. Это создает гормональный дисбаланс.

Гормональные проблемы могут повлиять на развитие детенышей, из-за чего крольчиха-мать будет выделять капли во время родов. В некоторых случаях это также может снизить шансы матери на выживание.

Уход за беременным кроликом - Новости Матери-Земли

1 / 4

Пальпацию, которой следует научиться, если вы планируете разводить кроликов, можно проводить самке через 10–12 дней после случки.

Иллюстрация Элары Танги

2 / 4

Плоды крольчихи на десятый день беременности должны быть размером с оливку или виноградину.

Иллюстрация Элары Танги

3 / 4

Некоторые из них, как эта, с животом, перекрывающим талию, любят лежать в любимых позах во время беременности.

Иллюстрация Элары Танги

4 / 4

«Решение проблем выращивания кроликов» Карен Патри дает как начинающим владельцам домашних животных, так и опытным животноводам информацию о выращивании домашнего кролика.

Обложка предоставлена ​​издательством Storey Publishing

Решение проблем выращивания кроликов (Story Publishing, 2014) Карен Патри отвечает на вопросы и опасения по поводу содержания, кормления и разведения кроликов на каждом этапе их жизни. От выбора продуктивных мясных и волокнистых пород до подготовки подходящего гнезда и уговоров суетливого кролика поесть — вы найдете проверенные ответы и гуманные решения своих проблем с кролиководством.В следующем отрывке «Настало ли время?» из главы 7 «Беременный кролик» Патри учит вас, как определить, беременна ли ваша самка, и как содержать и кормить ее, если котята уже в пути.

Вы можете приобрести эту книгу в магазине НОВОСТЕЙ МАТЕРИ-ЗЕМЛИ: Решение проблем выращивания кроликов .

«Моя крольчиха беременна?» - вопрос, который волнует каждого владельца домашнего животного или кроликовода. Я знаю, что вы умираете от любопытства, но будьте уверены, что если ваш олень и ваша лань встретились, помет почти наверняка последует.Беременность кроликов удивительно предсказуема. Примерно в 99% случаев самка разжигает свой помет вечером 31-го дня после осеменения.

Так что можешь отметить две даты в календаре. Хорошо, три свидания, если ты ищешь ответ как можно скорее.

• День 12: Пропальпируйте живот самки на наличие явных признаков беременности.
• День 28: Дайте ланьке гнездо, набитое материалами для строительства гнезда.
• День 31: Ожидайте наборы поздним вечером. Это может быть то же самое, что и утро 32-го дня, когда вы вскакиваете с постели и мчитесь к клетке своего кролика, чтобы увидеть, действительно ли наступил благословенный день.

Однако не паникуйте, если кроликов нет; некоторые из них могут быть причудливыми и могут просто цепляться за эти комплекты, чтобы заставить вас подождать несколько дополнительных дней.

Есть, однако, надоедливая, раздражающая мелочь, называемая ложной беременностью. Это когда ваш кролик обманывает вас, заставляя думать, что он может быть беременным. Она могла бы даже построить прекрасное гнездо. А потом . . . ничего.

Вся сенсация прямо здесь, в этой главе.

Моя крольчиха беременна?

В. Как узнать, беременна ли моя крольчиха?

A. Единственный верный способ узнать, беременна ли самка, кроме анализа крови, это пальпировать ее живот. По мере того, как котята растут, они образуют выпуклости вдоль двойных рогов матки кролика. Немного потренировавшись, вы сможете отчетливо почувствовать эти выпуклости к тому времени, когда кролику исполнится 10–12 дней. Вот как пальпировать:

1. Положите самку на ровную поверхность перед собой так, чтобы ее голова была ближе к вам.

2. Зафиксируйте ее круп одной рукой (чтобы она не могла отступить назад) и просунитесь под нее другой рукой ладонью вверх.

3. Линия позвоночника делит брюшко на две половины и отмечает внутреннюю границу обеих половин.

4. Кончиками пальцев с одной стороны и кончиком большого пальца с другой можно осмотреть или пропальпировать обе половины нижней части живота одновременно.

5. С усилием, достаточным для того, чтобы частично приподнять заднюю часть самки со стола, осторожно и осторожно проведите кончиками пальцев по всей длине ее живота.

Вы ищете уплотнения размером с виноградину не по центру, а по обеим сторонам живота.Маленькие твердые комки вдоль центральной линии живота кролика представляют собой фекальные шарики, выстроившиеся в один ряд на пути к выходу из кролика. Крошечный клубок мягких «спагетти» прямо перед тазом — это обычно пустая матка.

Q. Как рано я могу определить, беременна ли крольчиха?

A. В течение первой недели беременности трудно, если не невозможно, точно установить, беременна ли ваша самка. Если вы знакомы со своей самкой и уже имели с ней несколько пометов, вы, возможно, сможете различить те тонкие, субъективные изменения в поведении, которые указывают на повышение уровня гормонов беременности.В противном случае просто пропальпируйте на 10 или 12 день и посмотрите, что вы обнаружите.

В. Как узнать, когда родится мой кролик?

A. Календарь — ваш лучший друг. Отметьте, когда самка осеменилась, и отсчитайте 31 день вперед. Если вы не знаете эту дату, то тщательная пальпация может помочь выявить размер плода и, следовательно, дать вам приблизительное представление о том, когда она может загореться.

• Размером с шарик на 8-й день
• Размером с оливку или виноградину на 10-й день
• Размером в четверть или полдоллара на 14-й день
• Размером с небольшое яйцо на 21-й день

К тому времени, когда зародыши достигают размера яйца, их становится все труднее отличить от кишок. Но вы должны чувствовать, что живот необычно наполнен. Кроме того, беременность находится на достаточно позднем этапе, если вы можете видеть или чувствовать толчки крошечных ножек снаружи живота или боков самки. Если вы не можете точно определить, когда она должна родить, безопаснее просто дать ей гнездо, наполненное материалами для гнездования, и оставить ее в покое, чтобы она могла заниматься своими делами.

Q. Сколько длится беременность крольчихи?

A. Беременность кроликов составляет почти ровно 31 день.Тем не менее, кролики могут время от времени воспламеняться в любое время между 28 и 35 днями, и очень немногие кролики когда-либо ждали воспламенения дольше 39 дней. Неизвестно, как долго кролик когда-либо находился в помете, но самый длинный срок доставки живого помета, о котором я когда-либо слышал, составлял 42 дня. Размер помета также влияет на дату родов: более крупные пометы, как правило, разжигаются раньше, а маленькие - позже.

Иногда отдельные кролики танцуют под собственную дудку. Например, данная самка всегда может зажечься на день раньше или на день позже.Тем не менее, вы почти всегда можете взять 31-й день в банк, независимо от того, какую конкретную породу домашнего кролика вы выращиваете.

В. Когда у моей крольчихи появятся признаки беременности?

A. Ответ полностью зависит от конкретного кролика. Многие обычно дружелюбные кролики становятся капризными в течение нескольких дней. Признаете ли вы изменения поведения или настроения признаком беременности, возможно, это отдельный вопрос. Несколько других кроликов остаются такими же приятными в течение нескольких недель.Единственный верный способ определить это — провести пальпацию примерно на 10-й день.

Q. Помимо пальпации, как я могу определить, беременна ли крольчиха?

A. Без пальпации можно полагаться только на календарь и на различные признаки у самки, вызванные изменением ее гормонов. Первым признаком является то, что самка может стать капризной, капризной, агрессивной и даже злой. На второй и третьей неделе она наберет около полуфунта, в зависимости от ее породы. Она также может начать царапать углы своей клетки или разрушать ковры в углах вашей спальни своими зубами и когтями.

В течение третьей и четвертой недели вы можете начать видеть «сенообразные усы». Это когда самка в огромных количествах набивает в рот сено и солому и таскает их по клетке в поисках идеального места для гнезда. На поздних сроках беременности вы можете наблюдать короткие судорожные толчки младенцев в ее животе; лань также может выдернуть из себя несколько пучков меха и отдохнуть перед важным днем.

Q. Я увидел мех в клетке моего кролика. Может ли она быть беременна?

А. Возможно. Если ваша олениха была выведена около месяца назад и теперь тащит мех, пришло время подарить ей гнездо. Однако выдергивание шерсти может быть признаком ложной беременности.

Q. Беременна ли крольчиха, если она ласкает свою спутницу?

A. Гормоны беременности изменяют многое в поведении самки, но в данном случае ваша самка просто показывает другой самке, кто в доме хозяин. Вместо того, чтобы трахаться, беременная крольчиха с большей вероятностью нападет на оскорбительного товарища по клетке, который еще не является хорошим другом.Если вы не держите кроликов в больших колониях, безопаснее всего содержать беременную крольчиху в ее собственной клетке, где у нее будет место для спокойного выращивания помета.

В. Живот беременной крольчихи становится тугим?

A. Ну, он определенно становится полнее, чем обычно, хотя изменения не всегда видны под всем этим мехом. Если у нее не очень большой помет, она может не выглядеть очень беременной до последних нескольких дней.

Q. У беременных кроликов увеличивается жир в горле?

А. Этот «горловой жир» называется подвесом, который представляет собой менее жирный валик из кожи и меха. Подгрудок не обязательно становится больше во время беременности, но он достигает своего полного размера, когда самка взрослеет. Считается, что цель подгрудка состоит в том, чтобы предоставить самке дополнительный мех, чтобы выщипать его, чтобы выровнять свое гнездо. Мех с подвесом имеет тенденцию быть более густым и несколько длиннее, чем остальная часть шерсти. По мере того как возраст и гравитация берут верх, подвес часто начинает провисать. Тогда вы действительно можете увидеть шею под всем этим мехом.

В. Должен ли я давать крольчихе гнездо, если я думаю, что ее беременность ложная?

А. Да, а что, если ты ошибаешься? И ничего страшного, если ты прав.

Q. Кролики выдергивают шерсть только во время беременности?

A. Обычно, но крольчихи также выдергивают шерсть в конце ложной беременности.

Q. Будет ли кровотечение у крольчихи при ложной беременности?

А. №Крольчихи обычно не кровоточат во время нормальной беременности. Фактические роды вызывают кровотечение.

В. Почему моя самка вьет гнездо через два дня после спаривания?

A. У нее могла быть ложная беременность, когда вы ее повязали. Если это так, высока вероятность того, что размножение не привело к зачатию. На всякий случай было бы разумно отметить в календаре даты гнездования и растопки для размножения.

Уход и кормление беременной самки

В. Могу ли я держать других крольчих с беременной самкой?

A. Совместное проживание в одной клетке может создать больший стресс для беременной самки. Если клетка не очень большая, безопаснее всего не размещать беременную самку вместе с другими крольчихами.

Q. Могу ли я держать двух беременных крольчих вместе в большой клетке? Будут ли они кормить своих пометов в одной клетке?

A. Ответ сильно зависит от индивидуальных особенностей кроликов.Если обе являются доминирующими самками, они могут прибегнуть к драке и причинить вред друг другу или своим детям. Если они уже живут вместе и очень хорошо ладят, вы, безусловно, можете попробовать оставить их вместе. Я слышал о самках, которые зажигали своих кроликов в одном гнезде, а затем по очереди заботились обо всех котятах, хотя это нетипично. Однако, если кто-то из них станет агрессивным, будьте готовы разделить их до тех пор, пока оба помета не будут отняты от груди.

Если вы держите их вместе, вам понадобится достаточно большая клетка, чтобы вместить двух самок, два ящика для гнезд и целую стайку котят, пока им не исполнится несколько недель.Чем больше клетка, тем больше шансов на мир между ними.

Q. Какой корм лучше всего давать беременной крольчихе?

A. Коммерческие гранулы идеально подходят для увеличения количества корма от обычного рациона до полноценного корма в период с 14 по 21 день беременности. Кроме того, добавьте в рацион чайную ложку цельного овса или семян подсолнечника, чтобы удовлетворить потребность беременной самки в дополнительных жирах. (Семена подсолнуха лучше, чем овес, когда самка начинает лактировать, из-за их способности повышать выработку молока, потому что они содержат много жира и меньше углеводов.)

Если ваш кролик привык есть человеческую пищу, сохраняйте обычный режим кормления, увеличивая его рацион. Однако беременность создает дополнительную нагрузку на организм крольчихи, поэтому полностью избегайте любых сладких фруктов, чтобы не расстроить пищеварительную систему крольчихи или не нарушить ее здоровье.

Но для протокола: у вас нет , чтобы кормить чем-то еще, кроме полнорационных гранул.

Q. Я слышал, что если дать лани мясо или бекон, она не станет есть своих детенышей.Это правда?

A. Это бабушкины сказки. Некоторые люди дают мясо своим самкам, которые скоро разгорятся; едят его и, вуаля, не едят своих детей. Тогда владельцы клянутся, что котят пощадил бекон. Но кто может сказать, что является совпадением, а что фактом, если не было проведено никаких исследований для доказательства причины и следствия? Откуда вы знаете, что лань не ела бекон исключительно из-за жирности, чтобы у нее было больше молока?

Правда в том, что кролики травоядные.Их пищеварительная система не предназначена для мяса, и в дикой природе они никогда не охотятся на другое животное, чтобы поесть. Они должны были бы буквально голодать, чтобы даже подумать о том, чтобы грызть убитых на дороге или падаль. Их желудочно-кишечный тракт также не предназначен для поедания их младенцев, что они делают только тогда, когда страх смерти, реальной или воображаемой, разжигает их генетические инстинкты выживания.

Вот еще одна правда: лань не станет есть своих детенышей, если чувствует себя в безопасности в своей клетке. Поэтому убедитесь, что ее среда безопасна, тиха и свободна от хищников: вокруг сарая не обнюхивают койоты, еноты или крысы; нет людей, стучащих вокруг, или детей, кричащих; никаких домашних собак или кошек, пускающих слюни вне клетки. Это так же легко (или так же сложно).

В. Что делать, если беременная крольчиха не ест?

A. Может показаться, что беременная крольчиха перестает есть незадолго до родов или, по крайней мере, ест гораздо меньше, чем обычно. Одной из причин может быть давление ее полного живота на желудок. Или, может быть, она решила, что, поскольку вы так щедры на материалы для гнезд, она съест некоторые из них. Ничего страшного — все хорошо.

Оставьте корм в ее кормушке и дайте ей дополнительное травяное сено.Аппетит у нее возрастет, как только она зажжет подстилку. Убедитесь, что у нее не закончилась вода.

Хотите узнать, когда следует разводить кроликов? Прочтите «Решатель задач по выращиванию кроликов», чтобы узнать, когда следует спаривать самку для ее первого помета.

Выдержки из Решение проблем выращивания кроликов (c) Карен Патри, иллюстрации (c) Элары Танги, используются с разрешения Storey Publishing. Купите эту книгу в нашем магазине: Решение проблем выращивания кроликов: ответы на ваши вопросы о жилье, кормлении, поведении, медицинском обслуживании, разведении и разведении.

Опубликовано 11 ноября 2014 г.

РОДСТВЕННЫЕ СТАТЬИ

Взгляните на советы этих читателей о посеве семян, защите растений, чистоте вокруг кур и садовом инвентаре.

Целью нашего усадьбы было накопить 150 000 долларов на покупку ветхого имущества за наличные и его ремонт.В итоге мы перевыполнили эту цель.

Возможно ли выращивание орехового сада для вас? Эти советы по выращиванию орехового дерева помогут вам определить, является ли ответ убедительным «да».

Конкуренция за распределение материнско-плодовых ресурсов в кроличьей модели недоедающей беременности

Abstract

Основной целью животноводства является получение большого количества полезного мяса для потребителей. Ограничение питания матери (MFR) часто применяется на фермах для снижения производственных затрат. Тем не менее, пригодность MFR для сельскохозяйственных животных сомнительна, так как это управление может поставить под угрозу физическую форму матери из-за серьезного отрицательного энергетического баланса и может вызвать ограничение внутриутробного развития (IUGR) и пренатальное программирование у потомства. Здесь мы стремились определить, используя беременных кроликов, последствия MFR для материнского эндокринного и метаболического статуса и развития зачатия. Беременные самки были разделены на три группы: КОНТРОЛЬ (90 069 кормлений вволю, 90 070 кормлений в течение всей беременности; средняя продолжительность беременности около 31 дня), НЕДОСТАЮЩИЕ (50% ПСР в течение всей беременности) и РАННЕ-НЕДОДОЖДАЕМЫЕ (50% ПСР только в течение всей беременности). предимплантационный период, 0–7 сут).Концентрации материнского лептина, гликемический и липидный профили определяли на протяжении всей беременности, в то время как развитие зачатия оценивали ex-vivo на 28-й день. Параметры плаценты определяли с помощью макроскопических и гистологических оценок и оценок апоптоза (TUNEL и Caspase-3). Основные результаты исследования показали, что, несмотря на изменение MFR концентрации липидов в плазме крови матери (P<0,05), не было никакого влияния на массу тела матери, концентрацию лептина в плазме или гликемический профиль.Длина макушки-крестца плода была уменьшена в обеих группах с недоеданием (P<0,001), но значительное снижение массы плода наблюдалось только в группе с НЕДОСТАТОЧНЫМ КОРМЛЕНИЕМ (P<0,001). Рост в обеих группах с недоеданием был асимметричным, со сниженной массой печени (P<0,001) и значительно увеличенным отношением массы мозга к массе плода (P<0,001) и соотношением массы головного мозга и печени (P<0,001) по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой. Значительное снижение массы плаценты наблюдалось только в группе UNDERFED (P<0.001), несмотря на то, что обе группы с недоеданием демонстрируют более высокие показатели апоптоза в децидуальной зоне и зоне лабиринта (P<0,05), чем в КОНТРОЛЬНОЙ группе. Таким образом, в этих группах наблюдались признаки плацентарной дистрофии, некроза и коллапса стромы. Таким образом, MFR может побуждать мать принимать стратегические решения для сохранения своего метаболического статуса и физической формы за счет снижения роста в помете, что приводит к усилению апоптотических и патологических процессов на плацентарном уровне и ЗВУР.

Образец цитирования: Лопес-Телло Дж., Ариас-Альварес М., Хименес-Мартинес М.А., Гарсия-Гарсия Р.М., Родригес М., Лоренцо Гонсалес П.Л. и др.(2017) Конкуренция за распределение материнско-плодовых ресурсов в кроличьей модели недоедания при беременности. ПЛОС ОДИН 12(1): е0169194. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169194

Редактор: Christopher Torrens, Университет Саутгемптона, СОЕДИНЕННОЕ КОРОЛЕВСТВО

Получено: 19 июня 2016 г.; Принято: 13 декабря 2016 г.; Опубликовано: 3 января 2017 г.

Авторское право: © 2017 Lopez-Tello et al.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе.

Финансирование: Это исследование было поддержано Министерством науки и технологий Испании (AGL2011-23822; AGL2015-65572-C2-1-R) и Comunidad de Madrid (S2013/ABI-2913).Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Нет конфликта интересов, который мог бы нанести ущерб информации, представленной в статье, за исключением того, что AG-B является членом редакционной коллегии PLOS ONE. Однако это не меняет приверженности авторов всем политикам PLOS ONE в отношении обмена данными и материалами.

Введение

Основной целью животноводства является получение обильного и здорового мяса для потребителей, что зависит от надлежащего содержания племенных животных и периодов беременности [1].У сельскохозяйственных животных материнское питание широко признано ключевым фактором успеха беременности [1, 2]. Периоды ограничения питания матери (MFR) во время беременности могут привести к тому, что потомство будет страдать от внутриутробной задержки роста (IUGR), определяемой как неспособность плода достичь своего генетического потенциала [3]. Такая же ситуация была обнаружена и у людей, где MFR оказывает сильное влияние на возникновение IUGR и более высокую частоту неинфекционных заболеваний, таких как ожирение, когнитивные дисфункции или кардиометаболические расстройства [4–6].

У сельскохозяйственных животных интенсивные продуктивные ритмы и различные методы управления фермой, направленные на снижение производственных затрат, привели к более частому возникновению ЗВУР у этих животных [1, 7]. Это влияет на качество их мяса (мышечные волокна и мраморность), спортивные результаты или производство шерсти [2, 8] и, наконец, приводит к снижению доходов животноводов и снижению качества продукции для потребителей. Несмотря на эти неудобства, протоколы MFR, применяемые в определенные периоды беременности, такие как преимплантационный период, когда потребности эмбриона низкие, а у матери наблюдается анаболический статус, могут снизить производственные затраты и стать альтернативной стратегией на фермах [9, 10]. ].Однако преимущества и недостатки такого лечения требуют дальнейшего изучения, поскольку недостаточное питание на ранних сроках беременности может влиять на процессы плацентации (в частности, на выделение трофэктодермы и внутренней клеточной массы внутри бластоцисты [11]), что может нарушать развитие и функцию плаценты. [12], ставя под угрозу результаты беременности. Фактически, экспериментальные исследования показывают, что нарушение структуры или функции плаценты ( e , g . плацентарная недостаточность) может способствовать ЗВУР в ответ на недостаточность питания [12, 13].Большинство этих исследований было выполнено на грызунах [14], в то время как использование крупных животных редко. Тем не менее, крупные животные (овцы, свиньи или кролики) предлагают более широкий спектр преимуществ для целей этой оценки, поскольку результаты, полученные в этих испытаниях, особенно те, которые основаны на протоколах MFR, могут быть полезны не только для биомедицины, но и для расшифровки. вышеупомянутые преимущества и недостатки применения режимов MFR к сельскохозяйственным животным.

В последние годы кролик, считающийся сельскохозяйственным животным в Средиземноморье (производство мяса и клетчатки [15, 16]), стал ценной моделью для исследования IUGR [17–31] по сравнению с овцой. или свиньи, это животное не нуждается в больших помещениях для животных, а продолжительность беременности короче (срок около 31 дня; D31).Так, у кролика развивается дискоидная гемохориальная плацента, а у плодов наблюдается ускоренный перинатальный рост головного мозга, такие характеристики сравнимы с человеческими [32, 33]. Более того, гемодинамические изменения, происходящие во время беременности, также аналогичны человеческим, со значительным повышением артериального давления матери на протяжении всей беременности [32, 34]. У кроликов эффекты MFR во время беременности [17, 30, 31, 35–41] варьируются в зависимости от периода беременности, уровня применяемого ограничения и способности матери компенсировать, особенно на поздних сроках беременности, когда рост плода максимальный [42].Что касается матери, MFR обычно связан с метаболическими и гормональными изменениями [35–37] и низкой выработкой молока [38]. В то же время у плода могут наблюдаться гемодинамические изменения и неблагоприятные биометрические исходы [17, 30, 31, 39–41].

Ранее на других видах животных было показано, что MFR, основанный на предварительном зачатии или в ad libitum приеме пищи, может влиять на развитие плаценты [43], индуцировать ЗВУР [44] и программирование развития взрослых заболеваний у потомства [45].В предыдущей работе, используя кролика в качестве модели, мы оценили влияние MFR на основе потребления ad libitum до беременности [30, 31]. Однако в этих исследованиях MFR применяли, когда эмбрион кролика уже был имплантирован (с D9 до срока). MFR привела к ЗВУР плода (измеренная на 28-й день беременности и при рождении), несмотря на отсутствие различий в массе плаценты или перинатальной смертности. Здесь мы стремились определить последствия MFR, применяемого только в критический период преимплантации (D0-D7) или на протяжении всей беременности (D0 и далее) на: 1) потребление пищи матерью, эндокринный и метаболический статус самок, 2) плод. развитие в срок и 3) плацентарный гомеостаз, определяемый гистопатологическим исследованием и количественным определением апоптоза.

Материалы и методы

Животные и экспериментальный план

Исследование проводилось в соответствии с Испанской политикой защиты животных RD53/2013. Эксперимент был специально оценен и одобрен Комитетом по этике в исследованиях на животных Политехнического университета Мадрида (UPM), который называется Институциональным комитетом по уходу за животными и их использованию (IACUC) для UPM, и Мадридским сообществом, которое является орган, отвечающий за исследования на животных (см. ПРОЭКС 302/15). Самки содержались в помещениях для животных UPM, которые соответствуют местным, национальным и европейским требованиям к научно-исследовательским учреждениям. Перед экспериментальной фазой (за две недели до спаривания) в общей сложности 32 новозеландских х калифорнийских кроликов (средний вес 4,74 ± 0,12 кг) кормили вволю с рационом, содержащим 16% сырого протеина, 37% сырой клетчатки, 3,7% жира и 2400 ккал/кг сырой энергии (NANTA, Мадрид, Испания). В течение этого периода ежедневно регистрировали потребление корма каждой самкой.Самок осеменяли (D0 беременности) свежей разбавленной спермой (коммерческий разбавитель, MA 24, Ovejero, León, Spain). Каждая доза содержала не менее 25 миллионов сперматозоидов в 0,5 мл разбавителя (Magapor S.L., Сарагоса, Испания). Овуляцию индуцировали гонадорелином во время случки (20 мкг/самку, внутримышечно; Inducel-GnRH, Овехеро, Леон, Испания). В этот момент самки были случайным образом разделены на три группы: кормление вволю во время беременности (КОНТРОЛЬ; n = 9), 50% ограничение их предыдущего кормления вволю на протяжении всей беременности (НЕДОЖАРИВАНИЕ; n = 12) или ограничение только в преимплантационном периоде (D0-D7; ≈22% от общего числа беременностей) с последующим кормлением вволю до конца беременности (РАННЯЯ-НЕДОЕДАНИЕ; n = 11). Прием пищи также регистрировали еженедельно во всех экспериментальных группах в течение беременности.

Сбор образцов материнской крови

Оценка метаболических параметров и гормонов проводилась у пяти самок в каждой экспериментальной группе. Кровь получали еженедельно (Д0, Д7, Д14, Д21, Д28) путем пункции уха. Кровь помещали в пробирки с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) в качестве антикоагулянта и центрифугировали в течение 15 мин при 1200 g с получением ≈2 мл плазмы на женщину. Концентрации лептина определяли в одном анализе с использованием набора Multi-species Leptin RIA (Demeditec Diagnostics GmbH, Kiel, Germany).Чувствительность анализа составила 1,0 нг/мл, а коэффициент вариации внутри анализа составил 3,1%. Параметры, относящиеся к гликемическому (глюкоза и фруктозамин) и метаболизму липидов (общий холестерин, холестерин липопротеинов высокой плотности [HDL-c], холестерин липопротеинов низкой плотности [LDL-c] и триглицериды), измеряли на анализаторе клинической химии в соответствии с инструкции производителя (Saturno 300 plus. Crony Instruments sri, Рим, Италия).

Макроскопическое исследование плодов и плаценты

самки были взвешены и подвергнуты эвтаназии (30 мг/кг, внутривенное введение в маргинальную ушную вену; Dolethal, Мадрид, Испания) на 28-й день.Беременную матку удаляли медиальной лапаротомией и впоследствии взвешивали. Плоды отделяли от внезародышевых оболочек и классифицировали по следующим критериям: жизнеспособные (с правильной морфологией и массой для гестационного возраста), мумифицированные (мертвые в матке с признаками сморщивания и высыхания) или резорбированные (остаточная ткань плаценты, прикрепленная к плоду). эндометрий) (рис. 1). Скорость имплантации оценивали как отношение общего числа имплантированных плодов к желтых тел , присутствующих в яичниках.У жизнеспособных плодов перед обезглавливанием определяли длину от темени до крестца и массу тела с помощью весов и штангенциркуля, после чего взвешивали ткань мозга и печени. Соотношения веса мозга и печени к весу плода и отношения веса мозга к печени были получены как индексы ЗВУР [18, 46]. Наконец, плаценты от жизнеспособных плодов (кроме отобранных для гистопатологического исследования) взвешивали, отделяли отделы децидуальной оболочки и лабиринта и характеризовали их вес, длину, ширину и толщину с помощью весов и штангенциркуля.Плацентарную эффективность рассчитывали как отношение массы плода к массе плаценты [47, 48].

Микроскопическое исследование плаценты

Ближайшие к левому яичнику плаценты разрезали пополам, фиксировали в 4% параформальдегиде и на следующий день переводили на 70% этанол. Образцы [КОНТРОЛЬ (n = 8; одна плацента была исключена по техническим причинам), РАННЯЯ НЕДОЕДАНИЕ (n = 11), НЕДОЕДАНИЕ (n = 12)] заливали в парафин и делали срезы толщиной 4 мкм с помощью полуавтоматического ротационного микротома. (Leica, Wetzlar, Германия).

Гистопатологическое исследование плаценты было выполнено путем окрашивания всех образцов гематоксилином и эозином и анализа их под световым микроскопом (Olympus BX40, Гамбург, Германия) обученным патологоанатомом, не имеющим доступа к экспериментальным группам. Стромальный коллапс лабиринта и децидуальный склероз сосудистых каналов оценивали по следующим критериям: ничем не примечательный = 0, легкий = 1, умеренный = 2 и тяжелый = 3. Другие описательные патологические признаки, такие как некроз, минерализация и воспалительные инфильтраты, были записано.Ширину каждого плацентарного слоя (децидуальной оболочки, лабиринта и соединительной зоны) анализировали путем измерения пяти случайных полей каждого слоя под объективом 1,25x и получения среднего значения.

Степень апоптоза определяли с использованием набора для обнаружения апоптоза ApopTag in situ (Millipore Corp., Сан-Франциско, США) для мечения ник-конца, опосредованного терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой dUTP (TUNEL), в соответствии с инструкциями производителя и как ранее. описано [49].Срезы депарафинизировали и обрабатывали протеиназой К (Roche Diagnostics GmbH, Мангейм, Германия). Активность эндогенной пероксидазы блокировали 3% перекисью водорода в фосфатно-солевом буфере (PBS) и инкубировали с антидигоксигениновым конъюгатом во влажной камере при комнатной температуре в течение 30 мин. Срезы докрашивали метиловым зеленым. Десять случайных полей каждой плацентарной зоны были сфотографированы под объективом 20x и количественно оценены с использованием программного обеспечения Image J. Процент апоптотических клеток оценивали как количество окрашенных TUNEL ядер, деленное на общее количество окрашенных ядер на зону × 100 [49].

Чтобы подтвердить результаты, полученные при оценке TUNEL, мы также выполнили количественную оценку каспазы-3. Вкратце, активность эндогенной пероксидазы блокировали 30-минутной обработкой 3% пероксидазой водорода в абсолютном метаноле. Неспецифическое связывание блокировали путем инкубации срезов в 5% нормальной козьей сыворотке (sc-2043, Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния, США) и инкубировали в течение ночи с первичным антителом (1:25; антитело к каспазе-3 ab2171; Abcam, Кембридж, Великобритания). После последующих промывок срезы инкубировали с биотинилированным вторичным антителом против мыши (1:200; Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния, США), а затем с авидин-биотиновым комплексом (набор ABC Vector Elite, Vector Laboratories, Burlingame, CA). , США).После инкубации с хромогеном (набор субстратов Vector Nova RED для пероксидазы, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) срезы контрастно окрашивали гематоксилином и анализировали под световым микроскопом (Leica DM IL, Wetzlar, Germany). Процент положительного иммунного окрашивания каспазы-3 определяли как положительное окрашивание каспазы-3 в зоне (пиксели)/общая поверхность этой зоны (пиксели) x 100.

Статистический анализ

Статистический анализ был выполнен с помощью программного обеспечения SAS (Statistical Analysis System Institute Inc., Кэри, Северная Каролина, США). Влияние MFR на потребление пищи, лептин и метаболические параметры плазмы оценивали с помощью двустороннего дисперсионного анализа (ANOVA). Масса тела матери и параметры, связанные с развитием зачатия, были проанализированы с помощью однофакторного дисперсионного анализа с массой тела матери в начале испытания и числом плодов на суку в качестве ковариант, соответственно. Если были обнаружены значительные основные эффекты, для сравнения средних значений между группами использовался Т-критерий (для параметрических переменных) или критерий Крускала-Уоллиса (непараметрические переменные). Гистологические данные, относящиеся к процентам, были получены с помощью теста хи-квадрат. Все данные были представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего, а вероятности считались значимыми при P<0,05.

Результаты

Ранняя MFR-индуцированная компенсация потребления пищи матерью на более поздних сроках беременности и ограниченные изменения липидного обмена без влияния на массу тела, концентрацию лептина или гликемический профиль

Обе группы с недоеданием потребляли одинаковое количество пищи на 1^-й -й неделе беременности и демонстрировали значительные различия по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой (рис. 2а).После окончания ограничения группа РАННЕ-НЕДОСТАТОЧНОЙ значительно увеличила потребление пищи по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой в течение 2^-й -й и 3^-й -й недель беременности, но не в течение последней недели беременности, когда обе группы значительно снизили потребление пищи. прием пищи (рис. 2а). Эти изменения в рационе питания не были связаны с изменениями массы тела самок на 28-й день, рассчитанной после извлечения беременной матки (рис. 2b). Кроме того, MFR не влиял ни на концентрацию лептина в плазме (рис. 2с), ни на уровни глюкозы или фруктозамина (рис. 2d и 2e), но изменял метаболиты циркулирующих липидов в начале и середине беременности (от D0 до D14).В связи с этим в предимплантационном периоде (с D0 по D7) в КОНТРОЛЬНОЙ группе были обнаружены более высокие концентрации триглицеридов по сравнению с обеими группами с недоеданием (рис. 2f). Между тем, концентрации холестерина в плазме были значительно выше только в группе НЕДОСТАТОЧНОГО СЫТИЯ на 14 день по сравнению с в КОНТРОЛЬНОЙ и РАННЕЕ НЕДОСТАТОЧНОЙ группе (рис. 2g). На 7-й день концентрация ХС-ЛПВП в плазме была значительно снижена в обеих группах с недоеданием (рис. 2h), несмотря на то, что в течение одного и того же периода беременности концентрации ХС-ЛПНП увеличились в этих двух группах по сравнению с КОНТРОЛЬНЫМИ значениями (рис. 2i).Наконец, концентрации LDL-c оставались выше только в группе НЕДОСТАТОЧНОГО СЖАТИЯ до D14 по сравнению с группами РАННЕГО НЕДОСТАТОЧНОГО СЖАТИЯ и КОНТРОЛЯ (рис. 2i).

Рис. 2. Влияние MFR на потребление пищи матерью, массу тела и концентрацию лептина в плазме, глюцидов и липидов во время беременности.

Количество беременных самок на группу, использованных для рис. а) и б): КОНТРОЛЬ = 9, РАННЕ-НЕДОДОМНОЕ = 11, НЕДОДОМНОЕ = 12; Количество беременных маток на группу, использованных для рис. с) по i): КОНТРОЛЬ = 5, РАННЕ-НЕДОДОМНОЕ = 5, НЕДОДОМНОЕ = 5.Статистический анализ был выполнен с помощью ANOVA. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Различные верхние индексы указывают на значительные различия между группами (P<0,05).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169194.g002

MFR нарушил траекторию роста плода, но не изменил количество жизнеспособных плодов на 28-й день

MFR снижал массу беременной матки в группе НЕДОСТАТОЧНОГО КОРМЛЕНИЯ по сравнению с группами КОНТРОЛЯ и РАННЕГО НЕДОЕДАНИЯ, несмотря на отсутствие различий в количестве плодов в помете или частоте имплантации (Таблица 1). Плоды в группе НЕДОСТАТОЧНОГО СЖАТИЯ показали самые низкие длину темени и крестца и массу плода (общую, головы и туловища), в то время как в группе РАННЕГО НЕДОСТАТОЧНОГО СЖАТИЯ наблюдалось только значительное уменьшение длины темени-крестца по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой. Масса головного мозга и печени была значительно ниже в группе с НЕДОСТАТОЧНЫМ СЖЕДАНИЕМ по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой и группами с РАННИМ СНИЖЕНИЕМ СЖАТИЯ (Таблица 1). В группе РАННЕГО НЕДОЕДАНИЯ масса печени была значительно ниже, чем в КОНТРОЛЬНОЙ группе. Однако разницы в абсолютном весе мозга между этими двумя группами обнаружено не было.Оценка соотношения мозга показала значительное увеличение в обеих группах с недоеданием, в то время как соотношение печени было в равной степени снижено в группах РАННЕГО НЕДОЕДАНИЯ и НЕДОЕДАНИЯ по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой. Таким образом, весовое соотношение мозга и печени было выше в обеих ограниченных группах по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой.

Таблица 1. Влияние MFR на развитие концептуса в группах КОНТРОЛЯ, РАННЕ-НЕДОСТАТОЧНОМ или НЕДОСТАТОЧНОМ КОРМЛЕНИИ.

Данные получены от 9 до 12 плотин; Количество плодов в группе: КОНТРОЛЬ n = 105, РАННЕ-НЕДОСТАТОЧНЫЕ n = 126, НЕДОЕДАНИЕ n = 117.Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Различные верхние индексы указывают на значительные различия между группами (P<0,01). NS недостоверные различия.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169194.t001

MFR изменил развитие плаценты и привел к гистопатологическим изменениям и более высоким уровням апоптоза

Развитие плаценты было изменено в обеих группах, получавших недостаточное питание, с более серьезным эффектом, когда MFR проводился на протяжении всей беременности. MFR снижал массу плаценты только в группе UNDERFED, хотя наблюдалась компенсаторная плацентарная эффективность (измеряемая как отношение массы плода к плаценте; таблица 1).Размеры децидуальной оболочки и лабиринта были уменьшены в этой группе, за исключением ширины децидуальной оболочки, которая не показала существенных различий между группами. В группе РАННЕГО НЕДОЕДАНИЯ толщина лабиринта показала промежуточные значения между КОНТРОЛЬНОЙ и НЕДОСТАТОЧНОЙ группой. Других различий между группами по остальным измеренным макроскопическим параметрам не наблюдалось.

Значительные гистологические изменения представлены на рис. 3. Наиболее заметные изменения в плаценте произошли в группе UNDERFED, которая показала самое низкое значение ширины децидуальной оболочки (2.04 ± 0,32 мм) по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ (3,19 ± 0,32 мм) и группами РАННЕГО НЕДОЕДАНИЯ (3,08 ± 0,29 мм) (P<0,05). Таким образом, в децидуальной оболочке группы UNDERFED было меньше сосудов, большинство из которых содержало гиалинизированные и склеротические стенки и меньше поддерживающей стромы, чем в других группах (рис. 3). Строма лабиринта в обеих ограниченных группах была значительно уменьшена по ширине по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой (2,46 ± 0,14, 2,04 ± 0,19 и 3,03 ± 0,20 мм для РАННЕГО НЕДОЕДАНИЯ, НЕДОЕДАНИЯ и КОНТРОЛЬНОЙ группы соответственно; P<0.05). Уменьшение ширины соответствовало коллапсу стромы лабиринта, который содержал меньше клеток (сосудистый эндотелий и трофобласты), чем в КОНТРОЛЬНОЙ группе. Таким образом, в группе НЕДОСТАТОЧНОГО СЖАТИЯ наблюдались умеренные или тяжелые признаки коллапса, за которыми следовала несколько менее тяжелая группа РАННЕГО НЕДОСТАТОЧНОГО СЖАТИЯ (рис. 3). Некроз наблюдался во всех опытных группах без существенных различий (рис. 3). Слабая минерализация была связана с некрозом и также была незначительной между группами (рис. 3).Ширина соединительной зоны была одинаковой между группами (КОНТРОЛЬ: 0,42 ± 0,08 мм; РАННЕЕ НЕДОЕДАНИЕ: 0,35 ± 0,07 мм и НЕДОЕДАНИЕ: 0,30 ± 0,09 мм; P>0,05). Умеренное гетерофильное воспаление наблюдалось в трех слоях всех подопытных групп и находилось в пределах нормы для этого органа (рис. 3).

Рис. 3. Гистологические данные плаценты кроликов на 28-й день беременности в группах КОНТРОЛЯ, РАННЕГО НЕДОЕДАНИЯ и НЕДОЕДАНИЯ.

Рисунки от A до C: Лабиринт (Lz) и соединительная (Jz) зоны плаценты кролика в трех экспериментальных группах. (D & E) КОНТРОЛЬНЫЕ И РАННЕ-НЕдокормленные группы. Плотноклеточный лабиринт с эндотелием, выстланным сосудистыми каналами и трофобластами. (F) Лабиринт группы UNDERFED с вариабельно расположенными сосудистыми каналами, выстланными эндотелием, разделенными коллагеновыми волокнами (коллапс стромы) и трофобластами. Рисунки G-I: соединительная зона в трех экспериментальных группах. (G) КОНТРОЛЬНАЯ группа. Плотный соединительнотканный матрикс, поддерживающий стромальные клетки, трофобласты и кровеносные капилляры, простирающиеся в лабиринт.(H) РАННЯЯ НЕДОСТАТОЧНАЯ группа. Плотная соединительная ткань, содержащая стромальные клетки и трофобласты. (I) группа UNDERFED. Плотная соединительная ткань немного тоньше и содержит меньше стромальных клеток и трофобластов, чем в двух других экспериментальных группах. Покрывающий лабиринт содержит умеренно расположенные сосудистые каналы с уменьшенной клеточностью. Рисунки от J до L: Decidua (D) в трех экспериментальных группах. (J) ГРУППА УПРАВЛЕНИЯ. Нормальная децидуальная оболочка с большими сосудистыми синусами, стромой, фибрином и некрозом. (K) РАННЯЯ НЕДОСТАТОЧНАЯ группа.Крупный сосуд в децидуальной оболочке окружен обильной отечной стромой. (L) НЕДОСТАТОЧНАЯ группа. Заметно истонченный децидуальный слой с отстоящими друг от друга сосудами с гиалинизированными стенками, тромбом, окруженными плотным коллагеном стромы. Количество плацент в группе: КОНТРОЛЬ = 8, РАННЯЯ НЕДОЕДАНИЕ = 11, НЕДОЕДАНИЕ = 12; Статистический анализ проводили с помощью критерия хи-квадрат. На диаграммах и в таблице разные верхние индексы указывают на достоверные различия между группами (P<0,0001), NS на недостоверные различия.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169194.g003

Что касается уровня апоптоза плаценты, более высокие показатели, определенные с помощью анализа TUNEL, были обнаружены в обеих группах с недоеданием в децидуальной и лабиринтной зонах (рис. 4а). В соединительной зоне только в группе НЕДОСТАТОЧНОГО СЖАТИЯ наблюдался значительно более высокий показатель по сравнению с группами РАННЕГО НЕДОСТАТОЧНОГО СЖАТИЯ и КОНТРОЛЯ (рис. 4а). Результаты оценки уровней каспазы-3 (рис. 4b) были аналогичны результатам анализа TUNEL в децидуальной оболочке и зоне соединения.Напротив, лабиринт показал более высокие показатели иммуноокрашивания в группе НЕДОСТАТОЧНОГО КОРМЛЕНИЯ, за которой следовала группа РАННЕГО НЕДОСТАТОЧНОГО КОРМЛЕНИЯ и по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой.

Рис. 4. Оценка апоптоза плаценты кролика на 28-й день беременности. ( а ) Апоптоз, количественно определенный с помощью TUNEL (положительное окрашивание) в децидуальной оболочке, зоне соединения и лабиринте. ( б ) Локализация и процент каспазы-3 (положительное иммуноокрашивание) в децидуальной оболочке, зоне соединения и лабиринте.

Количество плацент в группе: КОНТРОЛЬ = 8, РАННЕ-НЕДОДОЖДЕНИЕ = 11, НЕДОДОМАНИЕ = 12; Статистический анализ был выполнен с помощью ANOVA.Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Различные верхние индексы на диаграммах указывают на значительные различия между группами (P<0,05).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0169194.g004

Обсуждение

Текущее исследование показывает, что MFR, применяемый к беременным кроликам, несмотря на отсутствие существенных изменений в массе тела матери, концентрации лептина в плазме или глицидных метаболитов, влияет на концентрацию липидов у матери на ранних и средних сроках беременности, но не на поздних сроках беременности, когда плод рост экспоненциальный.Применение МФР только в преимплантационном периоде не приводило к снижению массы плода, но было достаточно для нарушения длины темени и крестца и нарушения органогенеза. В соответствии с этими выводами, серьезные изменения в развитии плаценты и плода могут наблюдаться, когда MFR сохраняется на протяжении всей беременности (рис. 5).

Отсутствие влияния MFR на массу тела матери, обнаруженное в текущем исследовании, подтверждает предыдущие исследования на кроликах [30, 38, 41] и отличается от других видов животных, у которых применение MFR приводило к потере массы тела матери, например, у грызунов [50–41]. 53], овец [54, 55] и приматов [56, 57].Эти различия между видами и экспериментальными исследованиями могут быть связаны с управлением кормлением (кормление ad libitum , кормление против требований к поддержанию), запасами жира до экспериментальной фазы или могут быть также связаны с репродуктивными стратегиями, принятыми матерями [58]. . В этом смысле недоедающие самки имели аналогичные показатели имплантации и размеры помета по сравнению с КОНТРОЛЬНОЙ группой. Эти результаты могут свидетельствовать о том, что недоедающие матери не вкладывают больше, чем необходимо, в рост своего потомства в качестве превентивной стратегии для будущих беременностей и для собственного энергетического баланса [58].Несмотря на то, что рост потомства был затронут, недоедающие самки могли накопить ресурсы, чтобы справиться с лактацией, чтобы гарантировать лучшее питание потомства, постнатальную выживаемость и рост и, следовательно, обеспечить передачу материнских генов будущим поколениям [58].

Одновременно концентрация лептина в плазме не снижалась ни в одной из групп нашего исследования, в отличие от предыдущих работ на кроликах [37], мышах [51, 59] и овцах [55]. Мы предполагаем, что отсутствие различий в нашем исследовании может объясняться разными фактами.На первый взгляд, наиболее очевидная причина может быть связана с количеством отобранных животных. Однако размер выборки был рассчитан в соответствии с исследованием Menchetti et al. [37], которые обнаружили вариации профиля лептина у аналогичного количества беременных крольчих. Другие объяснения могут включать повышенную выработку лептина тканями матери, плаценты или плода [52, 60]. Эта гипотеза может подкрепить идею о том, что, несмотря на ограничение, количества пищи может быть достаточно для удовлетворения потребностей матери и плода.Экспрессия лептин-РНК в материнской жировой и фетоплацентарной тканях должна подтверждать эту идею. Наконец, на концентрацию лептина может влиять гормональная среда, особенно инсулин и/или глюкоза [61], эстрогены [62] или глюкокортикоиды, которые, как было показано, индуцируют экспрессию лептина [63].

Напротив, липиды материнской плазмы изменились, но только на ранних и средних сроках беременности. Такой период беременности можно рассматривать как анаболическое состояние из-за низкой потребности развивающегося потомства [64, 65].Напротив, мы не наблюдали каких-либо изменений липидного профиля в течение последней трети беременности, периода ускоренного распада жировых отложений для удовлетворения потребностей плода [66, 67]. В связи с этим концентрация холестерина в плазме и концентрации Х-ЛПНП повышались в группах с недоеданием в период с 7 по 14 день беременности, что позволяет предположить, что определенный уровень мобилизации жира может быть необходим, чтобы справиться с процессом имплантации [68], образованием желточного мешка и установление хорио-аллантоисного плацентарного кровообращения [69].Напротив, в КОНТРОЛЬной группе концентрация ЛПВП повышалась, чтобы вернуть избыток холестерина из периферических тканей обратно в печень в ответ на адекватный уровень ресурсов [70]. Кроме того, материнские концентрации триглицеридов были ниже в обеих группах с недоеданием, что может быть механизмом увеличения отложения жира в материнской жировой ткани во время лактации [71]. В целом, эти результаты могут еще раз усилить вышеупомянутые стратегии, принятые матерями для ограничения распределения ресурсов на поздних сроках беременности в интересах себя и будущей лактации.

Следуя этому аргументу, плацента играет центральную роль в этом «перетягивании каната» за распределение питательных веществ, поскольку она является площадью поверхности для обмена между матерью и плодом [58; 72]. Эксперименты, основанные на генетических и диетических манипуляциях, показали, что плацента интерпретирует интересы плода и матери, адаптируя свой фенотип и функцию в зависимости от наличия ресурсов [72-74]. Примером этих захватывающих адаптаций является то, что недоедающие плаценты могут преодолевать MFR и поддерживать или даже увеличивать свою способность к переносу питательных веществ, чтобы помочь поддерживать рост плода [50]. В нашем исследовании масса плаценты была снижена в группе UNDERFED. Такие данные подтверждают гипотезу о том, что преимплантационный период может быть критическим моментом для установления плаценты, поскольку тот же уровень MFR, применяемый после имплантации (D9 беременности у кроликов), не снижает массу плаценты [31].

Наоборот, не было обнаружено серьезных макроскопических различий у РАННЕ-НЕДОЕДАННЫХ, подтверждая предыдущие результаты у овец, которые были ограничены только в начале-середине беременности, а затем вернулись к нормальному кормлению [75].Интересно, что микроскопическая оценка толщины плаценты показала значительное уменьшение расширения лабиринта в обеих группах с недоеданием, что подтверждает предыдущую работу [35]. Прогрессирующее уменьшение площади поверхности лабиринта может повлиять на плацентарные переносчики питательных веществ и способствовать неблагоприятному исходу плода. У крыс MFR на 50% подавлял экспрессию транспортера GLUT3 , что приводило к потомству с IUGR [76]. Кроме того, в модели MFR на приматах [77] были снижены экспрессия транспортеров глюкозы и аминокислот ( GLUT1 , TAUT , SNAT2 , LAT1 и LAT2 ), а также масса плаценты и плода. .Будущая работа должна оценить такие результаты в нашей кроличьей модели MFR и ее связь с IUGR.

Уменьшение размера децидуальной оболочки, наблюдаемое только в группе UNDERFED, может быть связано с двумя разными процессами. Во-первых, сниженная инвазия трофобласта могла нарушить правильный процесс ремоделирования спиральных артерий. Таким образом, высокая частота склеротических процессов в децидуальном сосудистом русле, наблюдаемая только в группе UNDERFED, может быть связана с высоким уровнем циркулирующего холестерина, наблюдаемым в этой группе на Д14.В этом смысле перекиси липидов и радикалы кислорода могут изменять эндотелиальные клетки, что приводит к отложению фибрина в стенках сосудов [67]. Следовательно, система артериальных синусов у кроликов, которая может быть идентифицирована в этот период беременности [78] и отвечает за сохранение материнского кровотока, а затем снабжение им области плода, может быть изменена, что приведет к ЗВУР. С другой стороны, уменьшение размера децидуальной оболочки может быть механизмом этих плацент для поддержки потребностей плода в росте за счет истощения их запасов гликогена, выделенных в мелких одноядерных клетках этого отдела плаценты [79], и, следовательно, может объяснить увеличение Плацентарная эффективность и снижение веса.Однако этот последний эффект остается спекулятивным в этом исследовании; дальнейшие исследования должны подтвердить эту гипотезу и определить запасы плацентарного гликогена в ограниченных плацентах самок кроликов, поскольку запасы гликогена в плаценте мышей являются важным источником глюкозы на последних стадиях беременности [80]. Однако мы продемонстрировали, что несбалансированное питание во время беременности вызывает более высокие темпы апоптоза, которые могли повлиять на развитие и функцию плаценты. Наше исследование устанавливает основы плацентарного апоптоза в плаценте кролика в срок и соответствует диапазону степени апоптоза, о котором сообщалось в предыдущих исследованиях MFR [49] и локализации плаценты у мышей [81], показывая более высокие показатели апоптоза в децидуальной оболочке. по отношению к остальным зонам.Таким образом, это исследование подтвердило, что апоптоз в ткани плаценты является биологическим явлением и может быть механизмом ремоделирования плаценты [82], который может быть связан с физиологическими дегенеративными механизмами кроличьей плаценты в ближайшее время [79, 83]. Однако MFR значительно увеличивает их показатели, что могло привести к плацентарной недостаточности и, следовательно, к ЗВУР.

Как и ожидалось, у плодов с НЕДОСТАТОЧНЫМ СЖАТИЕМ наблюдались наиболее явные признаки ЗВУР с уменьшением размера плода (массы и длины) и органов (мозга и печени).Это снижение массы плода, вызванное MFR, было ранее продемонстрировано на других животных, таких как грызуны [53, 84] и овцы [85]. Наши данные показали, что МФР, применяемая только в преимплантационном периоде, не снижает массу плода, несмотря на то, что это влияет как на размер плода, так и на его органогенез. Результаты, полученные при оценке соотношений, позволяют предположить определенный уровень асимметричной ЗВУР в обеих группах ПФР; усиление врожденных механизмов вазодилатации и шунтирования крови плода для защиты роста ключевых органов, таких как мозг (процесс, известный как «мозгосберегающий эффект»), даже за счет роста других тканей ( и . г . печень, тимус или скелетные мышцы) [31, 86, 87]. Возможные постнатальные последствия этих пренатальных адаптаций, вызванных MFR, в нашей модели остаются неясными. В предыдущей работе у потомства кроликов, развившихся в среде MFR, наблюдались изменения в поведении при приеме пищи, питье и двигательном поведении [88], что может свидетельствовать об изменениях в организации сети мозга. У людей у ​​детей с ЗВУР с сохраненным мозгом наблюдались худшие исходы развития нервной системы и поведения, чем у детей без признаков такого механизма [87].У грызунов, согласно недавнему обзору Sferruzzi-Perri и Camm [12], MFR может индуцировать ранние модификации в структуре головного мозга, способствуя позднему развитию заболеваний у потомства. Более того, стоимость сохранения мозга уменьшила массу печени в обеих группах с недоеданием, что очень важно для жизни новорожденных, поскольку способствует отложению жира и действует как источник факторов роста и гликогена. Кроме того, это пренатальное снижение массы печени наряду с возможной дисрегуляцией печеночного гена, уже описанной у крыс IUGR [89], может предрасполагать потомство к метаболическим заболеваниям во взрослом возрасте, таким как ожирение, резистентность к инсулину и диабет 2 типа [90–20]. 92].Эти адаптации, вероятно, будут иметь значение для последующего постнатального роста и качества мяса, как недавно было рассмотрено Chavatte-Palmer [2, 8]. У овец 50% MFR приводило к потомству с повышенным отложением жира и измененным метаболизмом глюкозы [93]. Однако самые последние исследования, проведенные на кроликах, не выявили различий в параметрах качества мяса, ограничивающих самок на 50% [94] или 75% [95].

В заключение, настоящее исследование помогло повысить осведомленность о влиянии MFR на беременность.Результаты настоящего исследования показывают, что MFR может побуждать матерей к принятию стратегических решений по сохранению их массы тела и метаболического статуса за счет снижения роста их пометов. Эти материнские решения связаны с умеренными изменениями липидного обмена в ограниченные периоды беременности (в основном во время развития эмбриона и раннего формирования плаценты), но не с секрецией лептина или метаболитов глюцидов. Таким образом, MFR ухудшает развитие плаценты и усиливает апоптотические процессы, что в конечном итоге может снизить ее функциональность и, наконец, вызвать ЗВУР. Плоды будут уменьшены в размерах, а органогенез может быть нарушен, даже если воздействие происходит только в преимплантационном периоде. Следовательно, эти результаты следует принимать во внимание, когда такие стратегии кормления применялись к сельскохозяйственным животным, поскольку у матерей нет четких доказательств, но может быть затронуто потомство. Кроме того, это исследование укрепляет использование кроликов в качестве надежных биомедицинских моделей в перинатальной области. Необходимы дополнительные исследования, чтобы определить возможные последствия, вызванные MFR для приспособленности потомства.

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Хуану Марию Флорес Ландейру и Службу гистологии и анатомической патологии UCM за набор ApopTag in situ. Авторы также благодарят миссис Аррибас-Валеро, миссис Санчес-Родригес, миссис Формозо-Рафферти, миссис Кахас и миссис Перес-Солана за их помощь. JL-T, MA-A, RMG-G, PLLG, AG-B и PGR являются членами ЕС COST-Action FA1201 «EPICONCEPT» и EU COST Action BM1308 «SALAAM».

Вклад авторов

1. Концептуализация: JL-T MA-A PGR.
2. Формальный анализ: JL-T MA-A RB-P AG-B PGR.
3. Методика: JL-T MA-A MAJ-M RMG-G MR PLLG RB-P AG-B PGR.
4. Письмо – первоначальный проект: JL-T MA-A MAJ-M AG-B PGR.
5. Написание – рецензирование и редактирование: JL-T MA-A MAJ-M RMG-G MR PLLG RB-P AG-B PGR.

Каталожные номера

1. 1. Ву Г., Базер Ф.В., Уоллес Дж.М., Спенсер Т.Е. Приглашенный советом обзор: задержка внутриутробного развития: значение для наук о животных.J Anim Sci. 2006;84(9):2316–37. пмид:16

   4

2. 2. Чаватт-Палмер П., Таррад А., Кифер Х., Дюрантон В., Джеммес Х. Разведение животных для получения качественных продуктов: не только генетика. Репродукция Fertil Dev. 2016;28(1–2):94–111. пмид:27062878
3. 3. Албу А., Анка А., Хорхояну В., Хорхояну И. Прогностические факторы задержки внутриутробного развития. Джей Мед Лайф. 2014;7(2):165–171. пмид:25408721
4. 4. Баркер диджей. Эволюционные истоки болезней взрослых.J Am Coll Nutr. 2004; 23 (6 Дополнение): 588–95 с. пмид:15640511
5. 5. Баркер диджей. Развивающие истоки благополучия. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2004;359(1449):1359–66. пмид:15347527
6. 6. де Ройдж С.Р., Воутерс Х., Йонкер Дж.Э., Пейнтер Р.С., Роузбум Т.Дж. Пренатальное недоедание и когнитивная функция в позднем взрослом возрасте. ПНАС. 2010;107(39):16881–6. пмид:20837515
7. 7. Кампос П.Х., Сильва Б.А., Донзеле Д.Л., Оливейра Р.Ф., Кнол Э.Ф. Влияние питания свиноматок во время супоросности на изменение массы тела при рождении в помете: обзор.Животное. 6; 2012: 797–806. пмид:22558927
8. 8. Шаватт-Палмер П., Ричард С., Пенье П., Роблес М., Руссо-Ральяр Д., Таррад А. Происхождение здоровья и болезней в процессе развития: важность для животноводства. Аним Репрод. 2015;12:505–20.
9. 9. Манал А.Ф., Тони М.А., Эццо О.Х. Ограничение кормления беременных нерожавших крольчих: последствия для репродуктивной функции и материнского поведения. Anim Reprod Sc. 2010;120(1):179–186.
10. 10. Rommers JM, Meijerhof R, Noordhuizen JP, Kemp B.Влияние уровня кормления на ранних сроках беременности на репродуктивный успех молодых кроликов не имеет. Anim Reprod Sci. 2004;81(1–2):151–8. пмид:14749056
11. 11. Квонг В.Ю., Уайлд А.Э., Робертс П., Уиллис А.С., Флеминг Т.П. Недоедание матери в предимплантационном периоде развития крыс вызывает аномалии бластоцисты и программирование постнатальной гипертензии. Разработка. 2000;127(19):4195–4202. пмид:10976051
12. 12. Сферруцци-Перри А.Н., Камм Э.Дж. Программирующая сила плаценты.Фронт Физиол. 2016;7:33. пмид:27014074
13. 13. Белкасеми Л., Нельсон Д.М., Десаи М., Росс М.Г. Недоедание матери влияет на развитие плаценты и плода. Биол Репрод. 2010 г.; 83(3):325–331. пмид:20445129
14. 14. Шредер HJ. Модели ограничения роста плода. ЭДЖОГ. 2003; 110:S29–S39.
15. 15. Аллен Д., Реньери С. Генетика производства волокна и характеристики шерсти у мелких жвачных животных, ангорского кролика и южноамериканских верблюдовых. Животное.2010;4(9):1472–81. пмид:22444694
16. 16. Далле Зотте А. Кролиководство для мясных целей. Границы животных. 2014;4(4):62–67.
17. 17. Эйксарх Э., Эрнандес-Андраде Э., Криспи Ф., Илла М., Торре И., Фигерас Ф. и др. Влияние селективной перевязки маточно-плацентарных сосудов на смертность плода и кардиоваскулярную допплерографию по сравнению с недостаточным питанием в кроличьей модели задержки внутриутробного развития. Плацента. 2011;32(4):304–9. пмид:21334065
18. 18.Харел С., Явин Э., Томер А., Барак Ю., Биндерман И. Мозг: соотношение тела и возраст зачатия у кроликов с задержкой внутриутробного роста, вызванной сосудами. Мозг Дев. 1985;7(6):575–9. пмид:3841706
19. 19. Bassan H, Trejo LL, Kariv N, Bassan M, Berger E, Fattal A, et al. Экспериментальная задержка внутриутробного развития изменяет развитие почек. Педиатр Нефрол. 2000;15(3–4):192–5. пмид:11149109
20. 20. Эйксарх Э., Фигерас Ф., Эрнандес-Андраде Э., Криспи Ф., Надаль А., Торре И. и др.Экспериментальная модель ограничения роста плода на основе селективной перевязки маточно-плацентарных сосудов беременной крольчихи. Диагностика плода Тер. 2009;26(4):203–11. пмид:19955698
21. 21. Бассан Х., Кидрон Д., Бассан М., Ротштейн М., Карив Н., Гилади Э. и др. Влияние задержки внутриутробного развития сосудов на кортикальные астроциты. J Matern Fetal Neonatal Med. 2010; 23: 595–600. пмид:19757337
22. 22. Eixarch E, Batalle D, Illa M, Munoz-Moreno E, Arbat-Plana A, Amat-Roldan I и др.Неонатальное нейроповедение и изменения диффузионной МРТ при реорганизации головного мозга из-за задержки внутриутробного развития на модели кролика. ПЛОС Один. 2012;7(2):e31497. пмид:22347486
23. 23. Гонсалес-Тендеро А., Торре И., Гарсия-Канадилья П., Криспи Ф., Гарсия-Гарсия Ф., Допазо Дж. и др. Ограничение внутриутробного развития связано с изменениями ультраструктуры сердца и экспрессии генов, связанными с энергетическим метаболизмом в модели кролика. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2013;305(12):h2752–60.пмид:24097427
24. 24. Илла М., Эйксарх Э., Баталле Д., Арбат-Плана А., Муньос-Морено Э., Фигерас Ф. и др. Долгосрочные функциональные результаты и корреляция с региональной связью головного мозга по показателям диффузионной трактографии МРТ в краткосрочной модели кролика с ограничением внутриутробного развития. ПЛОС Один. 2013;8(10):e76453. пмид:24143189
25. 25. Торре И., Гонсалес-Тендеро А., Гарсия-Канадилья П., Криспи Ф., Гарсия-Гарсия Ф., Бийненс Б. и др. Постоянные изменения сердечного саркомера в кроличьей модели задержки внутриутробного развития.ПЛОС Один. 2014;9(11):e113067. пмид:25402351
26. 26. Фигероа Х., Сифуэнтес Дж., Лозано М., Альварадо С., Кабесас С., Эйксарх Э. и др. Синтаза оксида азота и изменения уровней окислительного стресса в эмбриональной почке, наблюдаемые в модели ограничения внутриутробного роста у кроликов. Пренат Диагн. 2016.
27. 27. Thakur A, Sase M, Lee JJ, Thakur V, Buchmiller TL. Влияние дексаметазона на экспрессию инсулиноподобного фактора роста-1 в кроличьей модели задержки роста.J Pediatr Surg. 2000;35(6):898–904. пмид:10873033
28. 28. Лекарпантье Э., Морель О., Таррад А., Даирель М., Бонно М., Гаят Э. и др. Количественная оценка маточно-плацентарной васкуляризации в кроличьей модели ЗВУР с трехмерной энергетической допплеровской ангиографией. Плацента. 2012;33(10):769–75. пмид:22831881
29. 29. Таррад А., Лекарпантье Э., Гил С., Морел О., Зар Н., Дахирель М. и др. Анализ васкуляризации плаценты в фармакологической модели IUGR кролика, индуцированного L-NAME, ингибитором синтазы оксида азота. Плацента. 2014;35(4):254–9. пмид:24556056
30. 30. Лопес-Телло Дж., Барберо А., Гонсалес-Бульнес А., Астис С., Родригес М., Формозо-Рафферти Н. и др. Характеристика ранних изменений фетоплацентарной гемодинамики в модели ЗВУР у кроликов, вызванной диетой. J Dev Orig Health Dis. 2015;6(5):454–61. пмид:26268616
31. 31. Лопес-Телло Дж., Ариас-Альварес М., Хименес-Мартинес М.А., Барберо-Фернандес А., Гарсия-Гарсия Р.М., Родригес М. и др. Влияние силденафила цитрата на фетоплацентарное развитие и гемодинамику в кроличьей модели задержки внутриутробного развития.Репродукция Fertil Dev. 2016.
32. 32. Фишер Б., Чаватт-Палмер П., Вибан С., Наваррете Сантос А., Дурантон В. Кролик как репродуктивная модель здоровья человека. Репродукция. 2012;144(1):1–10. пмид:22580370
33. 33. Деррик М., Дробышевский А., Цзи Х., Чен Л., Ян Ю., Джи Х. и др. Гипоксия-ишемия вызывает стойкий дефицит движений в перинатальной кроличьей модели церебрального паралича: оценивается с помощью нового плавательного теста. Int J Dev Neurosci. 2009;27(6):549–57. пмид:19573586
34. 34.Полиска А., Скотти Л., Орланди Р., Бреккия Г., Боити С. Допплеровская оценка сосудов матери и плода во время нормальной беременности у кроликов. Териогенология. 2010;73(3): 358–366. пмид:19969340
35. 35. Мацуока Т., Мидзогути Ю., Ханэда Р., Оцука Э., Мидзугути Х., Фукуда К. и др. Влияние ограниченного кормления на развитие плода и плаценты у беременных кроликов. J Toxicol Sci. 2012;37(1):207–14. пмид:22293425
36. 36. Нафеа А., Ахмед С.А., Фэт Халла С.Влияние ограничения кормления во время беременности на производительность и продуктивность новозеландских белых кроликов. Вет Мед Инт. 2011;2011:839737. пмид:21
    3
37. 37. Менчетти Л., Бреккия Г., Канали С., Кардинали Р., Полиска А., Зерани М. и др. Ограничение питания во время беременности у кроликов: влияние на гормоны и метаболиты, участвующие в энергетическом гомеостазе и метаболическом программировании. рез. вет. 2015; 98:7–12. пмид:25499747
38. 38. Менчетти Л., Бреккья Г., Кардинали Р., Полиска А., Боити К.Ограничение питания во время беременности: влияние на состояние организма и продуктивность первородящих крольчих. Всемирная наука о кроликах. 2015; 23:1–8.
39. 39. Cappon GD, Fleeman TL, Chapin RE, Hurtt ME. Влияние ограничения кормления во время органогенеза на развитие эмбриона и плода кролика. Врожденные дефекты Res B Dev Reprod Toxicol. 2005;74(5):424–30. пмид:16249998
40. 40. Петрере Дж.А., Рон В.Р., Грэнтэм Л.Е., Андерсон Дж.А. Ограничение питания во время органогенеза у кроликов: влияние на репродукцию и потомство.Fundam Appl Toxicol. 1993;21(4):517–22. пмид:8253304
41. 41. Мацузава Т., Наката М., Гото И., Цусима М. Диетическая депривация вызывает потерю плода и аборт у кроликов. Токсикология. 1981;22(3):255–9. пмид:7340015
42. 42. Рейнольдс СРМ. Связь гидростатических условий в матке с размером и формой зачатия во время беременности: концепция аккомодации матки. Анат Рек. 1946; 95 (3): 283–296.
43. 43. Шульц Л.С., Шлитт Дж.М., Цезарь Г., Пеннингтон К.А.Лептин и реакция плаценты на ограничение питания матери на ранних сроках беременности у мышей. Биол Репрод. 2012;87(5):120. пмид:22993381
44. 44. Дуайер К.М., Мэджвик А.Дж., Уорд С.С., Стикленд, Северная Каролина. Влияние недоедания матери на ранних сроках беременности на развитие миофибрилл плода морской свинки. Репродукция Fertil Dev. 1995;7(5):1285–92. пмид:8848601
45. 45. Джонс А.П., Фридман М.И. Ожирение и аномалии адипоцитов у потомства крыс, недоедающих во время беременности.Наука. 1982; 215 (4539): 1518–9. пмид:7063860
46. 46. Кокс П., Мартон Т. Патологическая оценка ограничения внутриутробного развития. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. 2009;23(6):751–64. пмид:19854107
47. 47. Уилсон М.Э., Форд С.П. Сравнительные аспекты плацентарной эффективности. Доп. 2001; 58: 223–32. пмид:11980192
48. 48. Фоуден А.Л., Сферруцци-Перри А.Н., Коан П.М., Констанция М., Бертон Г.Дж. Плацентарная эффективность и адаптация: эндокринная регуляция.Дж. Физиол. 2009; 587 (часть 14): 3459–72. пмид:19451204
49. 49. Белкасеми Л., Чен Ч., Росс М. Г., Десаи М. Повышенный апоптоз плаценты при беременностях с ограничением питания матери: роль пути Fas. Плацента.2009;30:739–51. пмид:19616844
50. 50. Coan PM, Vaughan OR, Sekita Y, Finn SL, Burton GJ, Constancia M, et al. Адаптации плацентарного фенотипа поддерживают рост плода при недостаточном питании беременных мышей. Дж. Физиол. 2010; 588 (часть 3): 527–38. пмид:19948659
51. 51.Sferruzzi-Perri AN, Vaughan OR, Coan PM, Suciu MC, Darbyshire R, Constancia M, et al. Дефицит плацентарно-специфического Igf2 изменяет адаптацию развития к недоеданию у мышей. Эндокринология. 2011;152(8):3202–12. пмид:21673101
52. 52. Джелкс А., Белкасеми Л., Хан Г., Чонг В.Л., Росс М.Г., Десаи М. Парадоксальное повышение уровня лептина в материнской плазме при беременности с ограничением питания: вклад плацентарной и жировой ткани. Репрод науч. 2009;16(7):665–75. пмид:19372589
53. 53.Кинд К.Л., Симонетта Г., Клифтон П.М., Робинсон Д.С., Оуэнс Д.А. Влияние ограничения кормления матери на кровяное давление у взрослой морской свинки. Опыт физиол. 2002;87(4):469–77. пмид:12392111
54. 54. Satterfield MC, Bazer FW, Spencer TE, Wu G. Обработка силденафила цитратом повышает доступность аминокислот в зачатии и рост плода в овечьей модели ограничения внутриутробного развития. Дж Нутр. 2010;140(2):251–8. пмид:20018809
55. 55. Дебюс Н., Шаватт-Палмер П., Виудес Г., Камус С., Роузфор А., Хассун П.Недостаточное питание матерей в период до зачатия у овец Меринос д'Арль: 1. Влияние на результаты беременности и воспроизводства самок и показатели роста потомства. Териогенология. 2012;77(7):1453–65. пмид:22326588
56. 56. Родригес Дж.С., Бартлетт Т.К., Кинан К.Е., Натаниэльс П.В., Ниджланд М.Дж. Зависимые от пола когнитивные способности потомства павианов после ограничения калорий матери во время беременности и лактации. Репрод науч. 2012;19(5):493–504. пмид:22344725
57. 57. Антонов-Шлорке И., Шваб М., Кокс Л.А., Ли С., Стучлик К., Витте О.В. и соавт.Уязвимость мозга эмбриона приматов к умеренному снижению общей доступности питательных веществ матери. ПНАС. 2011;108(7):3011–6. пмид:21252306
58. 58. Фоуден А.Л., Мур Т. Распределение материнско-плодовых ресурсов: сотрудничество и конфликт. Плацента. 2012;33 Дополнение 2:e11–5.
59. 59. Шлитт Дж. М., Шульц Л. С. Источник лептина, а не истощение лептина в ответ на ограничение пищи, меняется на ранних сроках беременности у мышей. Эндокринный. 2012;41(2):227–35. пмид:22042484
60. 60.Кират Д., Хамид Н.А., Мохамед В.Е., Хамада М., Шалаби С.И. Экспрессия гена лептина у кроликов во время беременности и внутриутробной жизни. IJB. 2015;7(2): 113.
61. 61. Боден Г., Чен Х., Моццоли М., Райан И. Влияние голодания на уровень лептина в сыворотке у здоровых людей. J Clin Endocrinol Metab. 1996;81(9):3419–23. пмид:8784108
62. 62. Хенсон М.С., Кастракан В.Д. Лептин при беременности: обновление. Биол Репрод. 2006;74(2):218–29. пмид:16267210
63. 63. Де Вос П., Саладин Р., Оверкс Дж., Стаэлс Б.Индукция экспрессии гена ob кортикостероидами сопровождается потерей массы тела и снижением потребления пищи. Дж. Биол. Хим. 1995;270(27):15958–61. пмид:7608151
64. 64. Лейн К.Ю., Каталано П.М. Метаболические изменения во время беременности. Клин Обстет Гинекол. 2007;50(4):938–48. пмид:17982337
65. 65. Musial B, Fernandez-Twinn DS, Vaughan OR, Ozanne SE, Voshol P, Sferruzzi-Perri AN, et al. Близость к доставке изменяет чувствительность к инсулину и метаболизм глюкозы у беременных мышей.Сахарный диабет. 2016;65(4):851–60. пмид:26740602
66. 66. Эррера Э. Липидный обмен при беременности и его последствия для плода и новорожденного. Эндокринный. 2002;19(1):43–55. пмид:12583601
67. 67. Чанди А., Сирохивал Д. , Малик Р. Связь ранней гипертриглицеридемии матери с гипертонией, вызванной беременностью. Arch Gynecol Obstet. 2015;292(5):1135–43. пмид: 25855054
68. 68. Хоффман Л.Х., Брейнан Д.Р., Блауэр Г.Л. Кролик как модель для имплантации: исследования in vivo и in vitro.В Имплантация эмбрионов . Спрингер Нью-Йорк. 1999; 151–160.
69. 69. Карни Э.В., Скиэлли А.Р., Уотсон Р.Э., ДеСессо Дж.М. Механизмы, регулирующие токсическое воздействие эмбриона на ранних сроках беременности: межвидовое сравнение. Врожденные дефекты Res C Embryo Today. 2004;72(4):345–60. пмид:15662707
70. 70. Кондо А., Ли Дж., Манабе М., Сайто К., Канно Т., Маэкава М. Взаимосвязь между концентрациями липопротеинов высокой плотности-холестерина и модифицированных малондиальдегидом липопротеинов низкой плотности.J Атеросклеротический тромб. 2003;10(2):72–8. пмид:12740480
71. 71. Липпи Г., Альбиеро А., Монтаньяна М., Сальваньо Г.Л., Скеваролли С. , Франчи М. и др. Липидный и липопротеиновый профиль при физиологической беременности. Клин Лаборатория. 2007; 53 (3–4): 173–7. пмид:17447654
72. 72. Фоуден А.Л., Уорд Дж.В., Вудинг Ф.П., Форхед А.Дж., Констанция М. Программирование плацентарной транспортной способности питательных веществ. Дж. Физиол. 2006; 572 (часть 1): 5–15. пмид:16439433
73. 73. Сандовичи И., Хоэлле К., Анджолини Э., Констанция М.Адаптация плаценты к среде матери и плода: последствия для роста плода и программирования развития. Репрод Биомед Онлайн. 2012;25(1):68–89. пмид:22560117
74. 74. Сферруцци-Перри А.Н., Лопес-Телло Дж., Фоуден А.Л., Констанция М. Геномы матери и плода взаимодействуют посредством передачи сигналов фосфоинозитол-3-киназы (PI3K)-p110α для изменения распределения ресурсов плаценты. ПНАС. 2016;113(40):11255–11260. пмид:27621448
75. 75. Кларк Л., Хизман Л., Джунипер Д.Т., Саймондс М.Э.Материнское питание в начале и середине беременности и размер плаценты у овец. Бр Дж Нутр. 1998;79(4):359–64. пмид:9624227
76. 76. Лесаж Дж., Хан Д., Леонхардт М., Блондо Б., Бреан Б., Дюпуи Дж. П. Недоедание матери во время задержки внутриутробного роста крыс, вызванной поздними сроками беременности, связано с нарушением экспрессии плацентарного GLUT3, но не коррелирует с уровнями эндогенного кортикостерона. J Эндокринол. 2002;174(1):37–43. пмид:12098661
77. 77. Kavitha JV, Rosario FJ, Nijland MJ, McDonald TJ, Wu G, Kanai Y и др.Понижающая регуляция плацентарного mTOR, передачи сигналов инсулина / IGF-I и переносчиков питательных веществ в ответ на ограничение материнского питания у павианов. Фасеб Дж. 2014;28(3):1294–305. пмид:24334703
78. 78. Хан Х., Кусакабе К.Т., Вакитани С., Хияма М., Такешита А., Кисо Ю. Экспрессия и локализация изоферментов NO-синтазы (iNOS и eNOS) в развитии плаценты кролика. J Reprod Dev. 2012;58(2):231–236. пмид:22188879
79. 79. Сэмюэл К.А., Джек П.М., Натаниэль П. В.Ультраструктурные исследования плаценты крольчихи в последней трети беременности. J Reprod Fertil. 1975;45(1):9–14. пмид:1238566
80. 80. Коан П.М., Конрой Н., Бертон Г.Дж., Фергюсон-Смит А.С. Происхождение и характеристики клеток гликогена в развивающейся мышиной плаценте. Дев Дин. 2006;235(12):3280–94. пмид:17039549
81. 81. Му Дж., Канзаки Т., Томимацу Т., Фукуда Х., Васада К., Фуджи Э. и др. Экспрессия апоптоза в плацентах мышей, лишенных рецептора простагландина F.Плацента. 2002;23(2–3):215–23. пмид:11945089
82. 82. Смит С.К., Бейкер П.Н., Саймондс Э.М. Апоптоз плаценты при нормальной беременности человека. Am J Obstet Gynecol. 1997; 177: 57–65. пмид:9240583
83. 83. Ларсен Дж. Ф. Электронная микроскопия хориоаллантоисной плаценты кролика: II. Децидуальная оболочка и материнские сосуды. J Ultrastruct Res. 1963 год; 8 (3–4): 327–338.
84. 84. Camm EJ, Hansell JA, Kane AD, Herrera EA, Lewis C, Wong S, et al. Частичный вклад гипоксии развития и недоедания в пренатальные изменения соматического роста, структуры и функции сердечно-сосудистой системы.Am J Obstet Gynecol. 2010;203(5):495.e24–34.
85. 85. Kwon H, Ford SP, Bazer FW, Spencer TE, Nathanielsz PW, Nijland MJ и др. Ограничение питания матери снижает концентрацию аминокислот и полиаминов в материнской и эмбриональной плазме овец и эмбриональных жидкостях. Биол Репрод. 2004;71(3):901–8. пмид:15140798
86. 86. Санкаран С., Кайл П.М. Этиология и патогенез ЗВУР. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. 2009;23(6):765–77. пмид:19666240
87. 87.Коэн Э., Бэртс В., ван Бел Ф. Сохранение мозга при задержке внутриутробного развития: соображения для неонатолога. Неонатология. 2015;108(4):269–76. пмид:26330337
88. 88. Simitzis PE, Symeon GK, Kominakis AP, Bizelis IA, Chadio SE, Abas Z, et al. Серьезное недоедание матери и поведение крольчат после отъема. Физиол Поведение. 2015; 141:172–9. пмид: 25619951
89. 89. Чен Л.Х., Лян Л., Чжу В.Ф., Ван Ю.М., Чжу Дж.Ф. Влияние внутриутробного ограничения роста и диеты с высоким содержанием жиров на уровни липидов в сыворотке и уровни транскрипции родственных печеночных генов у крыс.Чжунго Данг Дай Эр Ке За Чжи. 2015;17(10):1124–30. пмид: 26483237
90. 90. Джордж Л.А., Чжан Л., Туерсунцзян Н., Ма И., Лонг Н.М., Утлаут А.Б. и др. Программы недоедания матерей в раннем возрасте увеличивали потребление корма, изменяли метаболизм глюкозы и секрецию инсулина, а также функцию печени у стареющих потомков женского пола. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2012;302(7):R795–804. пмид:22277936
91. 91. Соокоян С., Джанотти Т.Ф., Бургено А.Л., Пирола С.Дж. Метаболическое программирование плода и эпигенетические модификации: подход системной биологии.Педиатр рез. 2013; 73(4 ч. 2): 531–42. пмид:23314294
92. 92. Гонсалес-Булнес А., Астис С., Васкес-Гомес М., Гарсия-Контрерас С. Причины метаболических нарушений, связанные с развитием: потребность в биомаркерах-кандидатах и ​​терапевтических мишенях из адекватных доклинических моделей. Открытая протеомика EuPA. 2016.
93. 93. Ford SP, Hess BW, Schwope MM, Nijland MJ, Gilbert JS, Vonnahme KA, et al. Недоедание матери в период ранней и средней беременности у овец приводит к изменению роста, ожирению и толерантности к глюкозе у потомства мужского пола.J Anim Sci. 2007;85(5):1285–94. пмид:17224460
94. 94. Симеон Г.К., Голиомитис М., Бизелис И., Пападомичелакис Г., Пагонопулу О., Абас З. и соавт. Влияние недоедания гестационного матери на рост, состав туши и качество мяса потомства кроликов. ПЛОС Один. 2015;10(2):e0118259. пмид: 25671602
95. 95. Голиомитис М., Скупа Э.П., Конга А., Симеон Г.К., Харизмиаду М.А., Делигиоргис С.Г. Влияние ограничения кормления гестационного матери на показатели роста и мясные качества потомства кроликов.Животное. 2016;10(1):157–62. пмид: 26350799